2011104S细胞豚鼠皮肤成纤维样细胞

　　产品简介

　　【2011104S细胞豚鼠皮肤成纤维样细胞多用于科研试验。如何选购【2011104S细胞豚鼠皮肤成纤维样细胞】细胞株呢?拜力生物建议：采购前询问所买的【2011104S细胞豚鼠皮肤成纤维样细胞】是用的什么培养基以及什么血清，做好准备。*好也用同样品牌的培养基。询问所买细胞的一些生长特性，包括大约多少天可以传代等等。必要时索要所买细胞的一些技术资料。

　　产品详细信息

　　【2011104S细胞豚鼠皮肤成纤维样细胞】
　　【2011104S细胞豚鼠皮肤成纤维样细胞】组织类型

　　型号：咨询市场部 ，品牌：ATCC， 规格：株

　　【2011104S细胞豚鼠皮肤成纤维样细胞】冻存步骤

　　细胞冻存*常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻，细胞内外的水分会很快形成冰晶，从而引起一系列**反应。

　　细胞冻存操作步骤：

　　细胞1、选用生长情况好，数量较多的原代细胞，冻存前**换液一次。

　　细胞2、贴壁细胞需用0.25%胰酶常规消化将细胞消化下来，将细胞悬液收集至离心管中。

　　细胞3、1000rpm离心5分钟，弃上清液。

　　细胞4、沉淀加含DMSO的培养液，计数，调整至(1-10)×106/ml。

　　细胞5、将悬液分至冻存管中，每管1 ml。

　　细胞6、密封冻存管，封口一定要严，否则复苏时易出现爆裂。

　　细胞7、用记号笔标明细胞种类，冻存日期。

　　细胞8、按下列顺序降温：室温→4℃(20分钟〕→冰箱冷冻室(30分钟)→超低温冰箱(-80℃过夜)→液氮。

　　【2011104S细胞豚鼠皮肤成纤维样细胞】复苏步骤
　　一、细胞复苏的原则

　　在实际操作中，冻存细胞要进行复苏，再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化，以避免慢速融化水分渗入细胞内，再次形成胞内结晶损伤细胞。

　　二、细胞复苏的主要操作步骤

　　(1)佩戴眼镜和手套，从液氮罐中取出安瓿或冷冻管。

　　(2)迅速放入38℃水浴中，并不时摇动，在1分钟内使其完全融化，然后在无菌下取出细胞。

　　(3)在1000r/min速度下离心5～10分钟，弃去上层液，加入适量培养液后接种于培养瓶中，接种浓度1×109/L，置37℃温箱静置培养，次日更换一次培养液，继续培养，观察生长情况。若细胞密度较高，及时传代。或无需离心直接将细胞加入瓶中，并加入培养基贴壁培养12～24小时后，充去上清，换入新鲜培养基继续培养。

　　三、注意事项

　　在细胞复苏操作时，应注意融化冻存细胞速度要快，可不时摇动安瓿或冷冻管，使之尽快通过*易受损的温度段(-5～0℃)。这样复苏的冻存细胞存活率高，生长及形态良好。然而，由于冻存的细胞还受其他因素的影响，有时也会有部分细胞死亡。此时，可将不贴壁、飘浮在培养液上(已死亡)的细胞轻轻倒掉，再补以适量的新培养液，也会获得较为满意的结果。

　　【22011104S细胞豚鼠皮肤成纤维样细胞】购买流程
　　细胞工程是生物工程的一个重要方面。那怎样去选择(x细胞)细胞株呢?拜力生物来和你探讨一下：

　　购买(x细胞)细胞株需要考虑哪些因素,如何选购细胞株?

　　一、拜力生物总结推荐——国内细胞株选购指南：采购前询问所买的细胞是用的什么培养基以及什么血清，做好准备。*好也用同样品牌的培养基。询问所买细胞的一些生长特性，包括大约多少天可以传代等等。必要时索要所买细胞的一些技术资料。

　　二、拜力生物总结推荐——购买国外细胞株需要考虑的因素有如下几点：

　　1、细胞株的生物等级，由于有些细胞株及菌株属于管制品，所以从国外购货比较麻烦。

　　2、在购买国外细胞株时，需交待国外加比较多的干冰(一般在13公斤以上，采用比较密封的泡沫盒加套纸箱。

　　3、报关时尽量提供比较充足的证明材料，以免担搁时间而导致干冰挥发完细胞株死亡，甚至于被退回给发货人。

　　4、如果通过国外细胞株在国内的代理商购买的话，合同中需注明以下一些内容：

　　a. 明确的到货时间，这个时间需注明的是工作日，还是普通日。

　　b. 采用什么样的运输方法?

　　c. 如果属于技术外的因素而细胞株无法培养活，供方需负什么样的责任?

　　d. 细胞株的详细资料，以及细胞株的代数，其中，ATCC的细胞株一般都在几十代,这个需要与国外确认，IST-Banca可与他们的代理商联系索取详细资料!

　　三、合同约定注意事项需在合同中注明原装进口，避免相关公司鱼龙浑杂，从国外购买回一株细胞株，经过培养传代后，同时供应给几个人;一般国外进口的细胞株都会有原装的冻存管，而且每一支冻存管上都会有批号，而且每次的批号都不一样。

　　f. 在决定购买细胞株之前，必须仔细阅读他们的培养信息，所谓“细胞株未到，培养基先行一步”。

　　g. 在接到细胞株后，*好要求供应公司的人员现场参与，从而用于确认责任。

　　h. 在培养前，请确认您的二氧化碳培养箱二氧化碳浓度的准确性，国外的细胞株建议用进口的细胞培养瓶，比如：orange，corning, falcon品牌的培养瓶。

　　i. 询问你的代理商或者经销商，接到细胞株后是否需要离心置换出DMSO，因为有些细胞厂家建议不要离心，他们会认为离心而导致的碎片比DMSO产生毒性的害处更大，如果可以离心，转速不要过高，一般都在1000转以下，此处需要注意，因为有的公司会拿这一点来拒绝索赔!

　　j. 培养基的服务，仔细与供应商确认培养基的品牌及份量，以免供应商以些理由来推翻你索赔的理由。

　　四、复苏提醒

　　在细胞株复苏时，一定要先想好步骤再做，一步一步来做，避免导致操作中的污染，复苏是一个非常重要的步骤，往往容易导致污染，然后为污染所导致的杂质而伤透脑筋。拜力生物提醒。

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