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104C1细胞豚鼠胚胎细胞

日期:2024-05-19 07:55
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摘要:

  产品简介

  【104C1细胞豚鼠胚胎细胞】多用于科研试验。如何选购【104C1细胞豚鼠胚胎细胞】细胞株呢?拜力生物建议:采购前询问所买的【104C1细胞豚鼠胚胎细胞】是用的什么培养基以及什么血清,做好准备。*好也用同样品牌的培养基。询问所买细胞的一些生长特性,包括大约多少天可以传代等等。必要时索要所买细胞的一些技术资料。




  产品详细信息

  【104C1细胞豚鼠胚胎细胞】
  【104C1细胞豚鼠胚胎细胞】组织类型

  型号:咨询市场部 ,品牌:ATCC, 规格:株

  【104C1细胞豚鼠胚胎细胞】冻存步骤

  细胞冻存*常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。细胞在不加任何保护剂的情况下直接冷冻,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列**反应。

  细胞冻存操作步骤:

  细胞1、选用生长情况好,数量较多的原代细胞,冻存前**换液一次。

  细胞2、贴壁细胞需用0.25%胰酶常规消化将细胞消化下来,将细胞悬液收集至离心管中。

  细胞3、1000rpm离心5分钟,弃上清液。

  细胞4、沉淀加含DMSO的培养液,计数,调整至(1-10)×106/ml。

  细胞5、将悬液分至冻存管中,每管1 ml。

  细胞6、密封冻存管,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。

  细胞7、用记号笔标明细胞种类,冻存日期。

  细胞8、按下列顺序降温:室温→4℃(20分钟〕→冰箱冷冻室(30分钟)→超低温冰箱(-80℃过夜)→液氮。

  【104C1细胞豚鼠胚胎细胞】复苏步骤
  一、细胞复苏的原则

  在实际操作中,冻存细胞要进行复苏,再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化,以避免慢速融化水分渗入细胞内,再次形成胞内结晶损伤细胞。

  二、细胞复苏的主要操作步骤

  (1)佩戴眼镜和手套,从液氮罐中取出安瓿或冷冻管。

  (2)迅速放入38℃水浴中,并不时摇动,在1分钟内使其完全融化,然后在无菌下取出细胞。

  (3)在1000r/min速度下离心5~10分钟,弃去上层液,加入适量培养液后接种于培养瓶中,接种浓度1×109/L,置37℃温箱静置培养,次日更换一次培养液,继续培养,观察生长情况。若细胞密度较高,及时传代。或无需离心直接将细胞加入瓶中,并加入培养基贴壁培养12~24小时后,充去上清,换入新鲜培养基继续培养。

  三、注意事项

  在细胞复苏操作时,应注意融化冻存细胞速度要快,可不时摇动安瓿或冷冻管,使之尽快通过*易受损的温度段(-5~0℃)。这样复苏的冻存细胞存活率高,生长及形态良好。然而,由于冻存的细胞还受其他因素的影响,有时也会有部分细胞死亡。此时,可将不贴壁、飘浮在培养液上(已死亡)的细胞轻轻倒掉,再补以适量的新培养液,也会获得较为满意的结果。

  【104C1细胞豚鼠胚胎细胞】购买流程
  细胞工程是生物工程的一个重要方面。那怎样去选择(x细胞)细胞株呢?拜力生物来和你探讨一下:

  购买(x细胞)细胞株需要考虑哪些因素,如何选购细胞株?

  一、拜力生物总结推荐——国内细胞株选购指南:采购前询问所买的细胞是用的什么培养基以及什么血清,做好准备。*好也用同样品牌的培养基。询问所买细胞的一些生长特性,包括大约多少天可以传代等等。必要时索要所买细胞的一些技术资料。

  二、拜力生物总结推荐——购买国外细胞株需要考虑的因素有如下几点:

  1、细胞株的生物等级,由于有些细胞株及菌株属于管制品,所以从国外购货比较麻烦。

  2、在购买国外细胞株时,需交待国外加比较多的干冰(一般在13公斤以上,采用比较密封的泡沫盒加套纸箱。

  3、报关时尽量提供比较充足的证明材料,以免担搁时间而导致干冰挥发完细胞株死亡,甚至于被退回给发货人。

  4、如果通过国外细胞株在国内的代理商购买的话,合同中需注明以下一些内容:

  a. 明确的到货时间,这个时间需注明的是工作日,还是普通日。

  b. 采用什么样的运输方法?

  c. 如果属于技术外的因素而细胞株无法培养活,供方需负什么样的责任?

  d. 细胞株的详细资料,以及细胞株的代数,其中,ATCC的细胞株一般都在几十代,这个需要与国外确认,IST-Banca可与他们的代理商联系索取详细资料!

  三、合同约定注意事项需在合同中注明原装进口,避免相关公司鱼龙浑杂,从国外购买回一株细胞株,经过培养传代后,同时供应给几个人;一般国外进口的细胞株都会有原装的冻存管,而且每一支冻存管上都会有批号,而且每次的批号都不一样。

  f. 在决定购买细胞株之前,必须仔细阅读他们的培养信息,所谓“细胞株未到,培养基先行一步”。

  g. 在接到细胞株后,*好要求供应公司的人员现场参与,从而用于确认责任。

  h. 在培养前,请确认您的二氧化碳培养箱二氧化碳浓度的准确性,国外的细胞株建议用进口的细胞培养瓶,比如:orange,corning, falcon品牌的培养瓶。

  i. 询问你的代理商或者经销商,接到细胞株后是否需要离心置换出DMSO,因为有些细胞厂家建议不要离心,他们会认为离心而导致的碎片比DMSO产生毒性的害处更大,如果可以离心,转速不要过高,一般都在1000转以下,此处需要注意,因为有的公司会拿这一点来拒绝索赔!

  j. 培养基的服务,仔细与供应商确认培养基的品牌及份量,以免供应商以些理由来推翻你索赔的理由。

  四、复苏提醒

  在细胞株复苏时,一定要先想好步骤再做,一步一步来做,避免导致操作中的污染,复苏是一个非常重要的步骤,往往容易导致污染,然后为污染所导致的杂质而伤透脑筋。拜力生物提醒。

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